β-兴奋剂残留检测的主要工作在样品处理方面，所用时间占全部分析时间80%以上。样品的处理方法主要是液-液萃取、固相萃取、液相色谱、超临界萃取和透析等方法。β-兴奋剂残留分析的方法中色谱法应用最多，毛细管电泳法亦常用。
（1）样品提取：提取剂有叔丁基甲醚/正丁醇、乙酸乙酯、索楞森缓冲液（pH 7）、盐酸、高氯酸/EDTA、Tris缓冲液、磷酸盐缓冲液等。
（2）样品净化：Ultrabase C18柱LC净化，液-液分配；β-葡糖苷酸酶/硫酸酯酶水解，固相萃取净化；固相萃取净化；加氢氧化钡/氯化钡缓冲液透析；免疫亲和色谱净化；或Pellisular C18柱痕量富集。
（3）衍生化：三甲基环硼氧烷衍生，碳酰氯衍生，五氟丙酸酐衍生，N，O-双（三甲基硅烷）三氟乙酰胺衍生；N-甲基-N-（叔丁基二甲基硅烷基）三氟乙酰胺衍生（叔丁基对氧氮六环衍生）物；甲基或丁基硼酸衍生；或氯甲基二甲基氯硅烷衍生（2-二甲基硅烷基对氧氮六环衍生物）。
（4）气相色谱条件：流动相，氦气；固定相可以选择DB5毛细管柱、CP-Sil-8毛细管柱、HPSP5毛细管柱、OV-1701毛细管柱、CP-Sil-5CB毛细管柱、Permabond SE-52、WCOT RSL 150BP毛细管柱、HP1毛细管柱或OV-1毛细管柱等。
（5）液相色谱条件：文献报道的组合有Symmetry C18柱，0.01 mol/L醋酸缓冲液（pH 4.6）/甲醇，梯度从（70+30）到（30+70），UV 245 nm检测；Lichrospher 100 RP-18e分析柱和预柱（5 μm），水/甲醇（66+34）含1%甲酸，40℃，电化学检测；Inertsil 5 ODS分析柱和预柱（3 μm），0.01 mol/L醋酸铵/甲醇，梯度从（95+5）到（20+80），大气压化学电离（APCI）-MS/MS检测；Nova-Pak C18柱（4 μm），0.02 mol/L醋酸含25 mmol/L十二烷基磺酸钠（pH 3.5）/乙腈（53+47），柱后Bratton-Margall衍生化，Vis 494 nm/薄层层析和GC-MS检测；Lichrospher RP-select B柱（5 μm），0.02 mol/L磷酸二氢钾含30 μmol/L乙二胺四乙酸（pH 3.9）/甲醇（92.5+7.5）或0.02 mol/L磷酸盐缓冲液/甲醇（75+25）（克伦特罗）；Spherisorb C18柱（3 μm），溶剂A：水/乙腈/甲醇（95+2.5+2.5）含0.1%乙酸和5 mmol/L醋酸铵；溶剂B：水/乙腈/甲醇（5+47.5+47.5）含0.1%乙酸和5 mmol/L醋酸铵，体积比28：72，离子喷雾(ISP)-MS/MS检测。
14.2.5.4农药兽药残留分析国家标准
农药兽药和农畜产品的种类繁多，使用方法和残留特征没有明显的规律性，质量和安全监控要求了解和掌握农畜产品和食品中农药兽药的残留量，为了评判和比较，国家制定了相关的检测方法国家标准用于不同的目的，已经发布实施的有，GB/T 5009.145-2003《植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留量的测定》、GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》、GB/T 19648-2006《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》、GB/T 20769-2008《水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 19649-2006《粮谷中475种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》、GB/T 20770-2008《粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 19426-2006《蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》、GB/T 20771-2008《蜂蜜中486种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 23206-2008《果蔬汁、果酒中512种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质普法》、GB/T 19650-2006《动物肌肉中478种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》、GB/T 23376-2009《茶叶中农药多残留测定气相色谱/质谱法》、GB/T 23204-2008《茶叶中519种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》、GB/T 23205-2008《茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 5009.19-2008《食品中有机氯农药多组分残留量的测定》、GB/T 5009.162-2008《动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定》、GB/T 5009.218-2008《水果和蔬菜中多种农药残留量的测定》、GB/T 5009.103-2003《植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留量的测定》、GB/T 5009.20-2003《食品中有机磷农药残留量的测定》、GB/T5009.146-2008《植物性食品中有机氯和拟除虫菊脂类农药多种残留量的测定》、GB/T 18932.3-2002《蜂蜜中链霉素残留量的测定液相色谱法》、GB/T 20758-2006《牛肝和牛肉中睾酮、表睾酮、孕酮残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20756-2006《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20751-2006《鳗鱼及制品中十五种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20741-2006《禽肉中地塞米松残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20766-2006《牛猪肝肾和肌肉组织中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20755-2006《禽肉中九种青霉素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20752-2006《猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20744-2006《蜂蜜中甲硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑留残量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20765-2006《猪肝脏、肾脏和肌肉组织中维吉尼霉素M1残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20743-2006《猪肉、猪肝和猪肾中杆菌肽残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20753-2006《牛和猪脂肪中醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮残留量的测定液相色谱-紫外检测法》、GB/T 20747-2006《牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量的测定液相色谱-紫外检测法和液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20754-2006《禽肉中保泰松残留量的测定液相色谱-紫外检测法》、GB/T 20746-2006《牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧和喹乙醇及代谢产物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20745-2006《畜禽肉中癸氧喹酯残留量的测定液相色谱-荧光检测法》、GB/T 20763-2006《猪肾和肌肉组织中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20759-2006《畜禽肉中十六种磺胺类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20764-2006《可食动物肌肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱-紫外检测法》、GB/T 20742-2006《牛甲状腺和牛肉组织中硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巯基苯并咪唑残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、GB/T 20750-2006《牛肌肉中氟胺烟酸残留量的测定液相色谱-紫外检测法》等。
国家标准因时间和实际情况变化会不断修订和更新，使用时应注意检索最新版本。
复习思考题
1.农兽药残留测定前的样品预处理方法有哪些？
2.农兽药残留测定前的方法有哪些？各依据什么原理？
3.举例说明农兽药残留测定的具体方法、原理、仪器要求、主要步骤及注意事项。
