《兰亭序》是东晋右军将军王羲之51岁时的得意之笔。352年，即东晋永和九年三月三日，王羲之与友人谢安、孙绰等名流及亲朋共41人聚会于兰亭，行修禊之礼、饮酒赋诗。后来王羲之汇集各人的诗文编成集子，并写了一篇序，这就是著名的《兰亭序》。《兰亭序》记述了他与当朝众多达官显贵、文人墨客雅集兰亭的壮观景象，抒发了他对人之生死、修短随化的感叹。崇山峻岭之下，茂林修竹之边，乘带酒意，挥毫泼墨，为众人诗赋草成序文，文章清新优美，书法遒健飘逸。传说当时王羲之是乘着酒兴方酣之际，用蚕茧纸、鼠须笔疾书此序，通篇28行，324字，有复重者，皆变化不一，精美绝伦，被历代书界奉为极品。宋代书法大家米芾称其为“中国行书第一帖”。王羲之因此也被后世尊为“书圣”。
后人在研究其书法艺术时赞誉颇多：“点画秀美，行气流畅”，“清风出袖，明月入怀”，“飘若浮云，矫若惊龙”，“遒媚劲健，绝代所无”，“贵越群品，古今莫二”，冠以“中国行书第一帖”的美名实在无可争议。传说王羲之以后也曾再书《兰亭序》，但均逊色于原作，所以《兰亭序》原稿一直被王羲之视为传家之宝，为王氏后代收藏。传至王羲之第七代时，被唐太宗李世民“骗”入朝廷，唐太宗得《兰亭序》后，曾诏名手赵模、冯承素、虞世南、褚遂良等人勾摹数个乱真副本，分赐亲贵近臣，之后民间也广为临摹，但无一胜过王羲之的原作，所以《兰亭序》真迹被唐太宗视为稀世珍品，爱不释手，最后用以殉葬，从此后世人便再也看不到《兰亭序》的真迹了。
《兰亭序》首先是文辞方式的一种标立，他改革了东晋以前僵化呆滞的诗词类的古文言，首次运用口语化语词格式，代表了一种文学表达形式，确立一种新的文学体裁——散文。其次是对书法发展上的探索的创新，王羲之改革了钟繇书法的笔法，汲取了当时群众书法中的精华，把规范的楷书书写进一步随意性地发挥，使其既可识又书写流利，介于草书与楷书间，创造了书法发展中的一种新的书写形式和字体——行书。他是自刘德升之后将行书体完善成为更为成熟的“天下第一行书”。《兰亭序》又是一篇炙人口、文辞优美的散文、借景抒情，以事言志，其文为历代所推崇，表达作者乐观豁达的人生态度和超脱生死的生命境界，阐述了深邃的哲学思想，给当时的官场名利的角逐者以思索，给后人以启迪。
王羲之兰亭真迹今已遗失，后世相传皆为唐朝摹本，在唐摹本中以冯承素的“神龙本”为最著。此本摹写精细，笔法、墨气、行款、神韵皆体现出“书圣风范”，公认是最好的摹本，现藏于故宫博物院。2011年10月，由故宫博物院主办，汇集全世界100多件“兰亭文物”的兰亭大展开幕，为传承中华国宝，让更多的藏家有机会鉴赏，甚至收藏“天下第一行书”，经故宫博物院破例授权，300年书画老字号“荣宝斋”按授权原迹1：1高仿，再现“天下第一行书”之神韵。高仿《兰亭序》完全保留历代名家帝王题识、钤印等历史印迹，被称为“天下真迹一等”的艺术珍品。
《兰亭序》是我国书法史上的珍品，它的笔法、气势、内容均无可挑剔，“中国行书第一帖”的称呼当之无愧。
