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第21章 “克隆”不走样——动物细胞培养

动物细胞培养是指从动物体内取出相关的组织,再把它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。

通常,动物细胞培养液中还有大量的葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和血清等。动物细胞培养能否成功的关键在于培养液中是否含有动物血清,因为动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境。动物血清是指血浆中除去纤维蛋白的液体,能提供基本的营养物质。此外,动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育。

动物细胞培养的条件是:无菌、无毒的环境;营养物质(合成培养基);温度和pH值(36.5±0.5℃,7.2~7.4);气体环境(氧气和二氧化碳)等。

动物细胞培养的基本过程:取动物胚胎或幼龄动物器官、组织,将材料剪碎,并用胰蛋白酶处理(消化),分离形成单个细胞,将单个的细胞放入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理,再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,将培养10代以内的培养称为原代培养;10代以后的培养称为传代培养。培养10~50代的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变而出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。

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